23405bb Internship

SoSe 15: P Protein-Proteininteraktion in vivo und in vitro Kurs B

Eberhard Klauck

Information for students

zusätzlich 2 Plätze für Biochemiker

Additional information / Pre-requisites

Falls sie an diesem Kurs teilnehmen möchten, senden Sie mir bitte spätestens bis zum 01.06.2015 eine kurze Anmeldungsmail und ihrer Matrikelnummer (ebklauck@zedat.fu-berlin.de). Am 02.06.2015 erhalten Sie dann von mir eine Antwortmail mit der definitiven Zu- oder Absage für eine Kursteilnahme. Falls es mehr Anmeldungen als Plätze gibt, muss das Losverfahren entscheiden. close

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Anhand einer in ihren molekularen Details gut bekannten Interaktion von zwei Escherichia coli Proteinen (RpoS und RssB) werden in dem Modul verschiedene Methoden des Nachweises von Proteininteraktionen in vivo und in vitro besprochen und durchgeführt. Als Beispiel für den Nachweis einer Interaktion zwischen Proteinen in vivo verwenden wir ein bakterielles Two-Hybrid System. Für die In vitro-Experimente werden die benötigten Proteine überproduziert und gereinigt. Es werden Coelutionsexperimente durchgeführt. Der Nachweis der Proteine erfolgt über Westernblot mit spezifischen Antikörpern oder direkt durch SDS-PAGE. Zusätzlich erfolgt der Nachweis einer Interaktion durch verschiedene Crosslinker. Zusätzlich sollen verschiedene E. coli-Mutanten durch unterschiedliche Experimente eindeutig identifiziert werden. close

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