23415c
Praktikum
WiSe 16/17: P Methoden der Pflanzenmolekularbiologie
Reinhard Kunze, Jan-Erik Leuendorf, Thomas Schmülling und MitarbeiterInnen der Angewandten Genetik
Hinweise für Studierende
zusätzlich 1 Platz für Biochemiker; Das Modul ist in der Ausrichtung Allgemeine Biologie sowie in den Spezialisierungen Molekular- und Zellbiologie und Pflanzenwissenschaften studierbar.
Zusätzl. Angaben / Voraussetzungen
verbindliche Vorbesprechung Mo 14.11.2016 um 17:00 Albrecht-Thaer-Weg 6, Seminarraum Neubau
Kommentar
Inhalt
Im Praktikum werden folgende Versuche durchgeführt: (1) Klonierung des Reportergens GUS in ein high-copy number Plasmid und Insertion des Gens in einen binären Pflanzenvektor. (2) Verifizierung der hergestellten Plasmide durch Restriktionsanalyse, PCR, DNA-Sequenzierung und Expression des Reportergenprodukts. Es folgt die Agrobacterium tumefaciens-vermittelte Transformation der Pflanzen und die funktionelle Analyse des Reportergenprodukts. (3) Nachweis und Charakterisierung der Insertion des Transgens in das Genom der transformierten Pflanzen durch Southern- und Western-Blotting. (4) Analyse der Gewebespezifität von Pflanzenpromotoren durch den Nachweis der Reportergenaktivität (GUS-Färbung) und exemplarische Analyse eines durch Tetracyclin induzierbaren Genexpressionssystems. (5) Nachweis und quantitative Erfassung der Expression des Reportergens auf RNA-Ebene in der Pflanze. Schließen
Im Praktikum werden folgende Versuche durchgeführt: (1) Klonierung des Reportergens GUS in ein high-copy number Plasmid und Insertion des Gens in einen binären Pflanzenvektor. (2) Verifizierung der hergestellten Plasmide durch Restriktionsanalyse, PCR, DNA-Sequenzierung und Expression des Reportergenprodukts. Es folgt die Agrobacterium tumefaciens-vermittelte Transformation der Pflanzen und die funktionelle Analyse des Reportergenprodukts. (3) Nachweis und Charakterisierung der Insertion des Transgens in das Genom der transformierten Pflanzen durch Southern- und Western-Blotting. (4) Analyse der Gewebespezifität von Pflanzenpromotoren durch den Nachweis der Reportergenaktivität (GUS-Färbung) und exemplarische Analyse eines durch Tetracyclin induzierbaren Genexpressionssystems. (5) Nachweis und quantitative Erfassung der Expression des Reportergens auf RNA-Ebene in der Pflanze. Schließen