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Praktikum
WiSe 20/21: P Molekulare Biologie E (AM)
Eberhard Klauck, Janine Lützkendorf, Daniela Pezzetta, Thomas Schmülling
Hinweise für Studierende
Aufgrund der coronabedingten Hygienemaßnahmen müssen erhebliche Einlass- und Auslassregelungen getroffen werden; die Kernzeit des Seminars und des Praktikums liegt von 15:00 bis 19:00.
Schutzkittel aus Baumwolle mitbringen
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Zusätzl. Angaben / Voraussetzungen
bitte ggf. nochmal mit den Dozierenden rückkoppeln, wann die Termine in Präsenz sind und wann online
Kommentar
Inhalt:
In diesem Modul werden grundlegende Methoden der Mikrobiologie und der molekularen Biologie von Pflanzen und Tieren gelehrt.
(1) Im Kursteil Mikrobiologie werden mikrobiologische Grundtechniken sowie die Beschreibung, Charakterisierung und Identifizierung von Bakterien mit einfachen mikrobiologischen Methoden erlernt: Herstellung von Medien, Sterilisation und Pasteurisierung, Wachstum von Bakterien in Komplex- und Minimalmedien, Evolution von Antibiotikaresistenzen, Anreicherung von Escherichia coli aus verschmutztem Wasser und Vergleich mit Trinkwasser, Anreicherung von Mikroorganismen aus verschiedenen Quellen, Beschreibung und Charakterisierung von Mikroorganismen, Gram-Färbung, Plattendiffusionstest zur Bestimmung von Antibiotikakonzentrationen, Stoffwechselphysiologische Charakterisierung und Differenzierung von Enterobacteriaceen.
(2) Im Kursteil Molekulare Biologie der Pflanzen werden molekularbiologische Grundtechniken erlernt: (a) Molekulargenetische Analyse von 'single nucleotide polymorphisms' (SNPs) unterschiedlicher Allele für den Geschmack "bitter": Isolierung menschlicher DNA aus der Mundschleimhaut, PCR-Analyse, Restriktionsverdau, Gelelektrophorese, Überprüfung der SNP-Analyse und Geschmacksempfindung; (b) Isolierung von DNA aus Tabak-Pflanzen, PCR-Analyse von Selektionsmarkern, Untersuchung von Promoteraktivität mittels des Reportergens GUS, induzierte GUS-Expression, Isolierung von Proteinen aus Tabakpflanzen, in vitro Test auf GUS-Enzym-Aktivität.
(3) Im Kursteil Molekulare Biologie der Tiere werden Grundlagen der allgemeinen und Entwicklungsgenetik erlernt:
(a) Genome verschiedener Organismen, Komplexität, C-Wert-Paradoxon, Genkartierung: Bestimmung der Orientierung eines klonierten Gens von Drosophila in einem Plasmid mittels Restriktionsverdau und Agarose- Gelelektrophorese,
(b) Themenkomplex: „Generierung transgener Tiere“: Strategien zur genetischen Manipulation, Molekularbiologische Tools, UAS-Gal4 System: RNA Interferenz (RNAi), P-Elemente (Mutagenese, Enhancer Trap, Transformation), Genomeditierung: CRISPR/Cas9 System --> Gewebsspezische Steuerung der Genexpression: Datananalyse von Mutanten im Vergleich zur Kontrolle
(c) Analyse von Expressionsmustern von Genen in der frühen Embryonalentwicklung von Drosophila. Schließen
In diesem Modul werden grundlegende Methoden der Mikrobiologie und der molekularen Biologie von Pflanzen und Tieren gelehrt.
(1) Im Kursteil Mikrobiologie werden mikrobiologische Grundtechniken sowie die Beschreibung, Charakterisierung und Identifizierung von Bakterien mit einfachen mikrobiologischen Methoden erlernt: Herstellung von Medien, Sterilisation und Pasteurisierung, Wachstum von Bakterien in Komplex- und Minimalmedien, Evolution von Antibiotikaresistenzen, Anreicherung von Escherichia coli aus verschmutztem Wasser und Vergleich mit Trinkwasser, Anreicherung von Mikroorganismen aus verschiedenen Quellen, Beschreibung und Charakterisierung von Mikroorganismen, Gram-Färbung, Plattendiffusionstest zur Bestimmung von Antibiotikakonzentrationen, Stoffwechselphysiologische Charakterisierung und Differenzierung von Enterobacteriaceen.
(2) Im Kursteil Molekulare Biologie der Pflanzen werden molekularbiologische Grundtechniken erlernt: (a) Molekulargenetische Analyse von 'single nucleotide polymorphisms' (SNPs) unterschiedlicher Allele für den Geschmack "bitter": Isolierung menschlicher DNA aus der Mundschleimhaut, PCR-Analyse, Restriktionsverdau, Gelelektrophorese, Überprüfung der SNP-Analyse und Geschmacksempfindung; (b) Isolierung von DNA aus Tabak-Pflanzen, PCR-Analyse von Selektionsmarkern, Untersuchung von Promoteraktivität mittels des Reportergens GUS, induzierte GUS-Expression, Isolierung von Proteinen aus Tabakpflanzen, in vitro Test auf GUS-Enzym-Aktivität.
(3) Im Kursteil Molekulare Biologie der Tiere werden Grundlagen der allgemeinen und Entwicklungsgenetik erlernt:
(a) Genome verschiedener Organismen, Komplexität, C-Wert-Paradoxon, Genkartierung: Bestimmung der Orientierung eines klonierten Gens von Drosophila in einem Plasmid mittels Restriktionsverdau und Agarose- Gelelektrophorese,
(b) Themenkomplex: „Generierung transgener Tiere“: Strategien zur genetischen Manipulation, Molekularbiologische Tools, UAS-Gal4 System: RNA Interferenz (RNAi), P-Elemente (Mutagenese, Enhancer Trap, Transformation), Genomeditierung: CRISPR/Cas9 System --> Gewebsspezische Steuerung der Genexpression: Datananalyse von Mutanten im Vergleich zur Kontrolle
(c) Analyse von Expressionsmustern von Genen in der frühen Embryonalentwicklung von Drosophila. Schließen
Zusätzliche Termine
Mo, 15.03.2021 14:00 - 20:00 Mi, 17.03.2021 07:00 - 13:00 Do, 18.03.2021 14:00 - 20:00 Mo, 22.03.2021 07:00 - 13:00 Di, 23.03.2021 14:00 - 20:00 Do, 25.03.2021 07:00 - 13:00