23422c
Internship
WiSe 20/21: P Methoden der Pflanzenmolekularbiologie
Valentin Hammoudi
Information for students
Aufgrund der coronabedingten Hygienemaßnahmen müssen erhebliche Einlass- und Auslassregelungen getroffen werden; die Kernzeit des Praktikums liegt von 11:00 bis 16:30.
Das Modul ist in der Ausrichtung Allgemeine Biologie sowie in den Spezialisierungen Molekular- und Zellbiologie und Pflanzenwissenschaften studierbar.
Please read the explanations about changes regarding certain courses/modules during the winter term 2020/2021. close
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Additional information / Pre-requisites
Verbindliche Vorbesprechung:
Mo 11.01.2021, online n.V.
Mo 11.01.2021, online n.V.
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Inhalt
Im Praktikum werden folgende Versuche durchgeführt: (1) Klonierung des Reportergens GUS in ein high-copy number Plasmid und Insertion des Gens in einen binären Pflanzenvektor. (2) Verifizierung der hergestellten Plasmide durch Restriktionsanalyse, PCR, DNA-Sequenzierung und Expression des Reportergenprodukts. Es folgt die Agrobacterium tumefaciens-vermittelte Transformation der Pflanzen und die funktionelle Analyse des Reportergenprodukts. (3) Nachweis und Charakterisierung der Insertion des Transgens in das Genom der transformierten Pflanzen durch Southern- und Western-Blotting. (4) Analyse der Gewebespezifität von Pflanzenpromotoren durch den Nachweis der Reportergenaktivität (GUS-Färbung) und exemplarische Analyse eines durch Tetracyclin induzierbaren Genexpressionssystems. (5) Nachweis und quantitative Erfassung der Expression des Reportergens auf RNA-Ebene in der Pflanze.
Qualifikationsziele:
Die Studentinnen und Studenten besitzen einen fundierten Überblick über die grundlegenden Methoden der Pflanzenmolekularbiologie und Pflanzengenetik. Sie sind in der Lage, ein breites Methodenspektrum selbstständig anzuwenden, Experimente zu planen, geeignete Methoden zu wählen und die Ergebnisse korrekt darzustellen und zu interpretieren. Sie besitzen ein sicheres und strukturiertes Wissen über die Anwendbarkeit verschiedener Analysemethoden in Pflanzen auf hohem Niveau, können einschlägige Fachbegriffe anwenden und neue Erkenntnisse erarbeiten und vermitteln. close
Im Praktikum werden folgende Versuche durchgeführt: (1) Klonierung des Reportergens GUS in ein high-copy number Plasmid und Insertion des Gens in einen binären Pflanzenvektor. (2) Verifizierung der hergestellten Plasmide durch Restriktionsanalyse, PCR, DNA-Sequenzierung und Expression des Reportergenprodukts. Es folgt die Agrobacterium tumefaciens-vermittelte Transformation der Pflanzen und die funktionelle Analyse des Reportergenprodukts. (3) Nachweis und Charakterisierung der Insertion des Transgens in das Genom der transformierten Pflanzen durch Southern- und Western-Blotting. (4) Analyse der Gewebespezifität von Pflanzenpromotoren durch den Nachweis der Reportergenaktivität (GUS-Färbung) und exemplarische Analyse eines durch Tetracyclin induzierbaren Genexpressionssystems. (5) Nachweis und quantitative Erfassung der Expression des Reportergens auf RNA-Ebene in der Pflanze.
Qualifikationsziele:
Die Studentinnen und Studenten besitzen einen fundierten Überblick über die grundlegenden Methoden der Pflanzenmolekularbiologie und Pflanzengenetik. Sie sind in der Lage, ein breites Methodenspektrum selbstständig anzuwenden, Experimente zu planen, geeignete Methoden zu wählen und die Ergebnisse korrekt darzustellen und zu interpretieren. Sie besitzen ein sicheres und strukturiertes Wissen über die Anwendbarkeit verschiedener Analysemethoden in Pflanzen auf hohem Niveau, können einschlägige Fachbegriffe anwenden und neue Erkenntnisse erarbeiten und vermitteln. close
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